编者按：我国南京大学医学院附属鼓楼医院感染科吴超教授团队长期以来进行以病毒性肝炎免疫调控及肝纤维化为研究重点的临床和基础研究。在2019年美国肝病学会（AASLD）年会上，共有病毒性肝炎及肝纤维化的五项临床和基础研究摘要录用，成果丰富。本刊特邀请吴超教授在大会现场分享了团队的最新研究进展。

 

吴超教授

 

构建非感染科住院患者丙肝筛查-诊疗临床新路径

 

慢性丙型肝炎病毒（HCV）感染是严重的全球公共卫生问题，随着直接抗病毒药物（DAAs）的上市，95%以上的慢性丙型肝炎（CHC）患者已可获得临床治愈。由于HCV感染的隐匿性，只有不到5％的CHC患者者知晓其感染状态。前期回顾性研究发现，医院非感染科的住院患者中，检测出HCV抗体阳性后，确诊率和随访率严重不足。因此，迫切需要建立新型临床路径来加强非感染科和感染科之间的协作，以更好地为CHC患者提供诊断和治疗。

 

为此，南京大学医学院附属鼓楼医院感染科吴超教授团队的陈雨欣博士、黄睿博士联合常州市第三人民医院肝病科柳龙根教授团队分别在江苏省两家三甲医院（南京大学医学院附属鼓楼医院和常州市第三人民医院）启动了针对非感染科患者建立针对丙型肝炎筛查-诊疗的新临床路径：院感科、检验科、感染科多学科协作，及时督促丙肝抗体阳性患者行丙肝RNA 检测；加强对非感染科的CHC患者的随访，为其就诊和实验室检查提供便捷服务。项目开展后，自2019年2月至10月，共有68.7％的非感染科住院患者进行了丙肝抗体检测，其中丙肝抗体阳性患者占0.54％。入组患者中，100%的丙肝抗体阳性患者都行丙肝RNA检测，其中42.3%的患者为丙肝RNA阳性。在丙肝确诊患者中，71.4%的患者前来肝炎门诊进行就诊。50.5%的前来就诊的丙诊患者接受了DAA治疗，16.4%的丙肝患者还在随访中。

 

综上，这个针对医院住院患者的丙型肝炎筛查-诊疗项目有效地增强了两家三甲医院的丙肝筛查率、诊断率和治疗率。这一临床路径的推广将有望成为在医院场景中消灭丙肝的重要策略。

 

慢性HBV感染者不同免疫状态及抗病毒治疗后血清sPD-1、sPD-L1的水平

 

近年来关于慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染的免疫发病机制及免疫治疗的研究较多，程序性死亡受体-1及其配体（PD-1/PD-L）信号通路已被证实参与其中。除了膜型的PD-1/PD-L外，循环中尚存在可溶性的PD-1（s PD-1）和PD-L1（s PD-L1），其在HBV感染者中研究很少，南京大学医学院附属鼓楼医院感染科吴超教授团队的夏娟博士、黄睿博士比较了慢性HBV感染者不同免疫状态及抗病毒治疗后血清sPD-1和sPD-L1的水平。

 

该研究共纳入11例健康对照、99例慢性HBV感染者，根据其血清学特点划分为非活动的携带组、免疫耐受组、HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）组、HBeAg阴性CHB组；并对其中32例接受核苷（酸）类似物抗病毒治疗的HBeAg阳性CHB患者进行为期5年的随访观察。结果发现慢性HBV感染者血清sPD-1和sPD-L1的水平显著高于健康对照组。免疫耐受、HBeAg阳性CHB和HBeAg阴性CHB患者血清sPD-1和sPD-L1的水平相似，均高于健康对照及非活动的携带组。抗病毒治疗后HBeAg阳性CHB患者血清sPD-1和sPD-L1的水平快速下降，且随访第2年时HBeAg转阴者基线血清sPD-1的水平显著低于HBeAg未转阴者。

 

该研究提示慢性HBV感染者不同免疫状态下血清sPD-1和sPD-L1的水平存在差异。基线低血清sPD-1水平的HBeAg阳性CHB患者抗病毒治疗后可能更易获得HBeAg的阴转，但研究结果仍需扩大样本量进一步证实。

 

合并非酒精性脂肪肝病对慢性乙型肝炎患者肝组织炎症和纤维化程度的影响

 

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发病率在全球呈逐年上升的趋势，慢性乙型肝炎（CHB）患者中合并NAFLD并不少见。但合并NAFLD对CHB患者肝组织炎症和纤维化程度的影响目前仍然存在争议。南京大学医学院附属鼓楼医院感染科吴超教授团队的黄睿博士、王健博士联合淮安市第四人民医院肝病科丁蔚茅主任团队以肝组织病理学作为金标准，分析了合并NAFLD对CHB患者肝组织炎症和纤维化程度的影响。

 

该研究回顾性收集2008年1月至2019年5月间南京大学医学院附属鼓楼医院和淮安第四人民医院接受肝组织病理学检查的CHB患者980例，根据纳入排除标准，最终纳入544例，比较合并与未合并NAFLD的CHB患者肝组织炎症和纤维化程度的差异，并采用Logistic回归方法分析合并NAFLD的危险因素。该研究结果发现共有93例（17.1%）CHB患者合并NAFLD。其中65例（69.9%）为F1级脂肪变，19例（20.4%）为F2级脂肪变，9例（9.7%）患者为F3级脂肪变。身体质量指数（BMI）（P=0.009）、尿酸水平（P=0.014）、甘油三酯水平（P=0.01）、合并2型糖尿病（P=0.006）是CHB患者合并NAFLD的独立危险因素。合并NAFLD的CHB患者肝组织炎症程度（P=0.007）及肝纤维化程度（P=0.016）均显著轻于未合并NAFLD的CHB患者。进一步多因素分析发现，合并NAFLD是显著肝纤维化的保护因素（OR=0.490，95% CI: 0.297-0.807）。

 

该研究提示对于CHB患者合并NAFLD并不会加重肝组织损伤，反而肝组织炎症和纤维化程度较未合并NAFLD的CHB患者轻，但研究结果仍需多中心大样本的临床研究进一步证实。

 

慢性乙型肝炎患者外周血2型滤泡辅助性T细胞（Tfh2）功能失调的探索研究

 

慢性乙型肝炎患者外周血2型滤泡辅助性T细胞（Tfh2）功能失调的探索研究

 

诱导慢性乙型肝炎（CHB）患者产生有保护效果的乙肝表面抗体（HBsAb）是目前临床功能性治愈的重要挑战。滤泡辅助性T细胞（Tfh）是B细胞向浆细胞分化的关键细胞，但在CHB患者循环中Tfh细胞亚群变化及其与HBsAg特异性B细胞功能间的关系并未完全阐明。外周血Tfh细胞包括三个亚群:T helper 1（Tfh1）、Tfh2和Tfh17细胞，具有不同的帮助B细胞的能力。除Tfh1外，Tfh2和Tfh17细胞能有效诱导幼稚B细胞通过IL-21依赖的途径产生免疫球蛋白。为此，南京大学医学院附属鼓楼医院感染科吴超教授团队的尹盛夏博士、陈雨欣博士等对CHB患者中的Tfh细胞和B细胞亚群的表型及功能进行了研究。

 

研究结果显示，与健康对照相比，CHB患者外周血中B细胞比例升高，且HBsAg特异性B细胞比例无明显差异，但通过ELISpot检测发现该群HBsAg特异性B细胞无法有效地分泌HBsAb。同时，CHB患者的外周血总Tfh细胞和Tfh17细胞明显减少，但总Tfh2细胞和激活状态的Tfh2细胞水平均显著升高。通过相关性分析，在患者外周血中激活的Tfh2细胞与HBsAg特异性功能障碍B细胞（IgD-CD27-）呈显著正相关，与HBsAg特异性浆母B细胞负相关，以上均提示Tfh2细胞可能存在功能失调。

 

该研究提示，在CHB患者外周血中Tfh细胞中激活状态的Tfh2细胞占主导地位，而其对B细胞辅助功能较差，这可能是CHB患者缺乏病毒特异性体液反应的原因之一。

 

单核细胞来源的巨噬细胞分泌GRN活化HSCs促进肝纤维化机制研究

 

肝纤维化是多种慢性肝病进展的共同病理过程。最新研究显示巨噬细胞可以分泌颗粒体蛋白（GRN）能通过活化HSCs促进胰腺癌细胞肝转移。南京大学医学院附属鼓楼医院感染科吴超教授团队的赵祥安博士、黄睿博士通过一系列体内外实验研究揭示了单核细胞来源的巨噬细胞分泌GRN通过活化HSCs促进肝纤维化的可能机制。

 

该研究发现CLD患者肝组织中GRN表达较正常对照组明显升高，且与肝脏炎症呈正相关，而不同病因之间肝组织GRN表达无明显差异。进一步在CCl4腹腔注射和胆管结扎这两种小鼠肝纤维化模型中，也证实肝组织GRN表达随着CCl4腹腔注射次数增加和胆管结扎时间延长明显增加。而在CCl4小鼠肝纤维化模型中，与野生型小鼠相比，GRN-/-小鼠肝脏中α-SMA和Col-1表达明显减轻。体外采用GRN刺激人HSC系LX-2细胞后，LX-2细胞表达ACTα2和Col1α1明显增加，而且STAT3磷酸化水平明显增加。进一步利用GRN与巨噬细胞表面分子荧光共染，观察在肝纤维化期肝脏中GRN表达来源，发现在对照小鼠肝组织GRN主要与F4/80荧光共染，而肝纤维化模型小鼠中肝组织GRN与CD11b共染明显增多。而肝纤维化小鼠模型中，F4/80+和CD11b+细胞数量也较空白正常对照组明显升高。提示单核细胞来源的巨噬细胞可能是肝纤维化时GRN的重要来源。利用GRN-/-小鼠的骨髓单核细胞和肝脏原代HSCs共培养，观察单核细胞来源的巨噬细胞对小鼠HSCs的活化作用。发现与野生型小鼠相比，GRN-/-小鼠骨髓单核细胞来源的巨噬细胞活化HSCs作用明显减轻。

 

该研究提示单核细胞来源的巨噬细胞可以通过分泌GRN促进HSCs活化促进肝纤维化，而GRN有可能可以作为未来肝纤维化的治疗靶点。

 

吴超教授团队合影

 

参考文献：（可上下滑动查看）

 

1.A program of hepatitis C surveillance with linkage to care for inpatients from non-infectious departments in two tertiary hospitals from Jiangsu, China. AASLD 2019 Abstract: 0557

 

2.Profiles of serum sPD-1 and sPD-L1 levels among chronic hepatitis B virus infected patients with different immune status and after antiviral treatment. AASLD 2019 Abstract: 0682

 

3.The impact of hepatic steatosis on liver injury in patients with chronic hepatitis B infection. AASLD 2019 Abstract: 0947

 

4.Circulating, dysfunctional Th2-biased follicular helper T cells dominate in patients with chronic hepatitis B infection. AASLD 2019 Abstract: 0993

 

5.Granulin secreted from monocyte-derived macrophages promotes liver fibrosis by activating HSCs. AASLD 2019 Abstract: 1486